Sele ak pwoblèm kontaminasyon nan plak kilti selil multiwell

Loading ak manyen nan milti-byen plak selil kilti:

Plak la kilti selil tou swiv prensip la nan strik asepsis lè fè operasyon selil yo. Tout operasyon yo dwe ofisyèl ak syantifik, epi yo pa pral lakòz plis enpak sou kwasans selil. Pwoblèm ki pi komen an se ki jan asire inifòmite a nan selil yo apre yo fin ajoute echantiyon an epi minimize enpak la nan chanje mwayen an sou eta a kwasans nan selil yo.

Mande:
Kouvèti yo nan 96 ak 24-byen plak kilti oswa petri asyèt yo trè ki lach, ki se pratik pou vantilasyon, men yo pral bakteri, mwazi ak lòt polyan tou glise nan?

Repons:
Kouvèti a se trè ki lach, ki fè pati nan semi-louvri kilti, ak objektif la nan sa a se van pase (an reyalite, li se fè CO2 a deyò plat la kilti konplètman echanj ak plat la kilti ak kenbe valè a pH nan kilti a mwayen).
Tout bagay gen avantaj ak dezavantaj, ki nan kou ogmante posibilite pou polisyon. Anplis de sa, sa lakòz likid la nan plat la evapore, ki se remakab pou dòz egzak nan dwòg. Se poutèt sa, de mezi sa yo ki nesesè: a. Lè a nan enkibatè a dwe pwòp (regilye limyè iltravyolèt, foubi alkòl, ak enkibatè a ta dwe louvri epi yo fèmen tankou ti kras ke posib) b. Imidite a nan enkibatè a dwe toujou kenbe nan 100% (koule a ak dlo esteril distile mete nan enkibatè a).
Jis tankou yon plat Petri, li se tou yon veso ki gen yon kouvèti tèt-desann, epi li pa pral polye. Sitou paske nan presyon an negatif nan vant lan ki te pwodwi pa "L" kwen nan kouvèti a, gen mikwo -òganis tache ak pousyè a, ak pousyè tè a te pote nan vant lan pa ka pase nan kwen nan kouvèti a ki jenere presyon negatif. Efè vantilasyon an se sèlman atravè difizyon nan lè a, epi yo pa gen okenn vantilasyon ap pwodwi, kidonk li pral sèlman respire epi yo pa antre nan bakteri.

Mande:
Sèvi ak yon plak 24-byen, gen operasyon nan kèk nan pwi yo (nan ban an ultra-pwòp), e gen selil yo dwe kiltive nan lòt pwi. Mwen enkyete ke sa pral lakòz kontaminasyon. Mwen pa konnen ki sa yo peye atansyon a?

Repons:
Si se operasyon an estanda nan ban an ultra-pwòp, li ta dwe OK. Mwen panse ke ou ka fè tout itilizasyon kouvèti plak kilti a, eseye ekspoze sèlman twou yo dwe opere, epi kouvri lòt twou yo ak kouvri.
Konsidere complète anvan ou itilize epi fè tout itilizasyon tout twou yo; Si ou sèlman bezwen sèvi ak yon twou kèk, ou ka itilize sèlman yon sèl bò, epi kouvri rès la ak yon kouvèti. Mwen itilize yo lè l sèvi avèk twou a dwa premye (li se pratik yo ajoute echantiyon nan men dwat la).

Lè opere, sèvi ak yon glisad vè kèk ogmante yon bò nan tablo a, pa louvri kouvèti a konplètman, jeneralman pa gen okenn pwoblèm.
Distribisyon selil inegal ak solisyon yo

Mande:
Selil yo inokule sou plak la kilti, ak selil yo toujou ranmase nan pati a periferik, ki jan fè fas ak li?

Repons:
Èske mwen ka mande ki jan selil ou yo melanje? Èske li pipeting oswa souke plak la kilti? Si li se lèt la, epi si li se souke nan yon sèk, li trè posib ke selil yo pral jete nan pati a periferik akòz fòs la santrifujeur, ki kapab lakòz yon mwens selil nan mitan yo. Plis pase kat semèn!
Isit la se yon bon fason: Anvan kiltive plak la pitit pitit, mete plak la kilti nan enkibatè a pou kèk èdtan nan saturation ak Lè sa a, pran li soti. Fòs la ta dwe limyè lè plante selil yo. Ajoute tou dousman pèmèt sispansyon an selil koule nan pwi yo nan plak la, ak selil yo kiltive fondamantalman grandi respire. Sonje pa janm souke ak yon shaker, oswa selil ou yo pral toufle ansanm tankou ou te di.
Pi piti dyamèt twou a nan plak la kilti, plis evidan sa a fenomèn se. Fenomèn sa a se inevitab pou 24 ak 96-byen plak, paske likid la suiv miray la pou ke solisyon an kilti nan pi a pa fòme yon nivo likid, men periferik la se wo, jis tankou yon glas konkav. Sepandan, lè w ap itilize de kalite sa yo nan plak orifis, li pa posib yo ajoute ase kantite lajan nan solisyon kilti akòz bezwen an pou entèvansyon adisyonèl, se konsa ke selil yo ap parèt "koleksyon kwen" ansanm ak solisyon an kilti. Sa depann de sa ki endikatè ou bezwen yo obsève. Si li se MTT, imunohistochimik pral afekte rezilta yo akòz stratifikasyon selil.
Lè dijere selil yo, peye atansyon sou pipeting respire pou evite touf selil yo, ak kantite lajan an nan solisyon kilti nan pi a ta dwe ase. Anjeneral, ajoute ase solisyon kilti lè inokulasyon, ak chanje solisyon an yon fwa lè ajoute entèvansyon. Kantite lajan an nan solisyon kilti ajoute nan solisyon an entèvansyon ki egal a kantite lajan an nan solisyon kilti nan moman sa a nan inokulasyon, nan ka sa a, fenomèn nan "seri kwen" yo pral amelyore, kidonk, ou ta ka kòm byen bay li yon eseye.

Mande:
Ki sa mwen te fè te eksperyans nan fòmasyon plak. Li pi bon pou gaye selil yo nan yon kouch inifòm. Pifò nan twou yo se amann lè se viris la inokule, ak kèk nan yo yo pa inifòm. Gen gwo diferans nan gwoup selil la. Mwen ta renmen mande w ki metòd ou itilize lè w ajoute selil yo?

Repons:
Li enpòtan pou pipèt selil yo nan yon sispansyon sèl-selil apre dijesyon! Asire w ke kantite selil ki nan chak byen konsistan lè divize plak la!
Natirèlman, gen tou faktè pwosesis. Paralelis ki genyen ant pwi yo tou trè enpòtan. Pou egzanp, lè ajoute medikaman, melanje medikaman an apre dilution asire ke konsantrasyon an nan chak byen se ki konsistan!
Anplis de sa, lè ajoute selil ak dwòg, gwoup la tès ak gwoup la kontwòl yo ta dwe ajoute nan vire pou fè pou evite diferans lan nan dansite selil ak konsantrasyon dwòg ki te koze pa sekans lan nan ajoute echantiyon!

Mande:
Mouche a se deja inifòm, men planch la, 6 twou, ak 24 twou yo toujou yon ti jan inegal, ak yon ti kras konsantre nan mitan yo. Anplis, li evidan ke konte a fèt, epi apre yon jou osinon de jou, dansite chak twou diferan, ki pral afekte deteksyon an. Èske gen yon bon fason?

Repons:
Si ou itilize yon pipèt pasteur, pa souse twòp chak fwa, paske selil yo nan pipèt la pral otomatikman koule, souvan kantite selil ki nan premye twou yo se gwo, ak sispansyon an selil se souvan inifòm, ak likid la pral Swiv wout la S-fòm.
Si ou itilize yon pipèt, konsèy yo ta dwe trete ak retire pou fè pou evite domaje selil yo, se konsa ke chak fwa se likid la pran koresponn ak yon pi. Li se pi egzat ajoute yon sèl-a-yon sèl twou ak pwent. Men tou peye atansyon sou melanje sispansyon an.

Pou mete kanpe yon gwoup paralèl, N dwe gwo ase (ou ka kalkile li).

Pa souke apre plating, kòm souke pral lakòz selil yo total nan direksyon pou sant la. Li pi bon pou gwo bout bwa yon fwa.

Plak kilti selil pore yongyue medikal te toujou konsidere kontwòl kalite kòm lavi sa a ki nan antrepriz la, ak pouswiv amelyorasyon nan kontinyèl nan compétitivité antrepriz. Konpayi an toujou suiv lespri antrepriz la nan obeyi lwa ak règleman, yo te strik ak disiplin pwòp tèt ou-, yo te toleran, ak nana yo pran responsablite kòm estanda a nan operasyon, kenbe ak agrandi mache a ak bon jan kalite ekselan ak sèvis ekselan, ak satisfè la Bezwen nan kliyan nan limit ki pi gran. . Win-genyen ak kliyan se objektif devlopman nou an. Yongyue Medikal! Patnè ou fè konfyans. Nou vle kolabore sensèman avèk ou pou kreye yon pi bon avni.